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恒远生物:产品文献:NLRC5 在大鼠肺纤维化中的作用及意义①

点击次数:32    发布时间:2019/11/8 10:41:46

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资料简介:

NLRC5 在大鼠肺纤维化中的作用及意义①
刘振欣,孙云晖,梁姗姗,牛圆圆,王国涛
( 佳木斯大学临床医学院,黑龙江 佳木斯 154003)

摘要: 目的: 简单探讨 NLRC5 在博来霉素致大鼠肺纤维化肺组织中的表达及意义。方法: 45 只大鼠按照随机数字表法随机分为空白对照组( N 组) 、博来霉素组( B 组) 、地塞米松组( D 组) 。B 组及 D 组采用博来霉素( 4mg /kg) 气管给药法制备大鼠肺纤维化模型,D 组从造模后第二天每日腹腔注射地塞米松( 3mg /kg) ,N 组及 B 组注射生理盐水作为对照。各组于第 7、14、28 天处死大鼠,规范留取肺组织,苏木精 - 依红( HE) 染色观察肺组织的病理动态改变,酶联免疫法( ELISA) 测定大鼠肺组织内 NLRC5 蛋白的表达量。结果: NLRC5 在 N 组低表达,B、D 组 NLRC5 表达量较 N 组显著增加,于第 28 天时达到峰值( P < 0. 05) 。结论: NLRC5 在博来霉素致大鼠肺纤维化形成过程中具有重要意义。
关键词: NLRC5; 大鼠; 肺纤维化
中图分类号: R563 文献标识码: A 文章编号: 1008 - 0104( 2018) 04 - 0066 - 02肺纤维化( pulmonaryfibrosis,PF) 是一种慢性进行性发展的肺部疾病,PF 至今无可治愈的药物,多数此病患者的治疗效果较差,病死率高,生活质量严重下降。NLRC5( NOD - like receptor family CARDdomain containing 5) 是目前发现的*的 NLRs 家族成员,因其在微生物感染免疫以及基因调控方面所起的重要作用,颇受研究者们的青睐和关注[1]。NLRC5 在脾脏、肺、胸腺和肝脏等免疫器官或组织中高度表达。说明 NLRC5 或许参与机体的系统炎症信号通路,进而引起一系列疾病,例如肺脏疾病。通过探讨 NLRC5 表达量观察 NLRC5 对大鼠肺纤维化的影响,从而研究 NLRC5 在博来霉素致大鼠肺纤维化形成中的作用。
1 资料与方法
1. 1 一般资料
成年清洁级 Wistar 大鼠 45 只,6 ~ 8 周龄,体重( 180 ~ 220) g,由哈尔滨医科大学动物实验中心提供。主要试剂及仪器: NLRC5 大鼠 ELISA 试剂盒( 上海 恒 远 生 物 科 技 有 限 公 司 提 供) Nikon eclipse50i 显微镜( 北京中仪光科科技发展有限公司提供) 。
1. 2 实验方法
博来霉素气管内注射给药诱导大鼠肺纤维化模型。在肺纤维化模型基础上第 2 日开始每日腹腔注射地塞米松注射液3mg /kg。对照组按照大鼠肺纤维化模型制备方法气管内注射等体积的 0. 9% 生理盐水注射液。B、D 组于博来霉素干预后第 7 天、14天、28 天,分别处死大鼠 5 只,对照组大鼠于气管内灌注生理盐水后 1d 处死,作为对照。标本采集: 麻醉大鼠: 腹腔内注射 10% 水合氯醛 3. 5mL /kg; 取肺组织: 开胸,剪开左心耳,经肺动脉注入 NS,冲洗双肺至肺脏呈苍白胶冻状。肺脏经病理宏观检查后,取出两肺,右肺置于 - 80℃ 冰箱保存备用。切取的左肺肺组织固定于 10% 中性福尔马林中,于 24h 更换福尔马林液,48h 取出,常规石蜡包埋,连续切片,切片厚度 4μm,切片常规用二甲苯脱蜡,经各级乙醇至水洗,进行 HE 染色。ELISA 法检测大鼠右肺肺组织 NLRC5 表达情况,严格按照大鼠酶联免疫吸附剂测定试剂盒说明书步骤。
1. 3 统计学方法
采用均值 ± 标准差 ( x珋± s) 表示,显著性检验采用单 因 素 方 差 分 析、各 组 采 用 LSD - t 检 验,P < 0. 05 认为有显著统计学意义。
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