上月底时，来自吉林大学的齐老师参与了我公司的优惠活动，购买人凝血因子elisa试剂盒。日前，齐老师带着一些相关产品使用的疑问咨询到了钱经理：“请问，用于免疫接种的抗原应如何制备呢？” 钱经理答道：抗原应溶解在缓冲溶液。不溶性抗原和可溶性的一样好。理想的抗原浓度是1mg/ml，然而较低浓度也可以接受的。您也可以把含有目标蛋白的SDS-PAGE胶发给我们，将胶放于水中变脱色，因为醋酸能使得蛋白质进一步地变性。
对此，还要注意避免：对动物有毒的添加剂。可接受：低量的SDS、咪唑、尿素、胍，非离子型去污剂，EDTA或EGTA和聚丙烯酰胺。添加的*终的量在很大程度上取决于样本体积/抗原浓度。
齐老师继续问道：“选择哪个物种用于免疫接种？”
使用IgG和IgY抗体针对同一抗原的优势：①独立确认预期的目标蛋白质被检测。②抗体库具有不同的特性，在不同的技术中能起到互补的作用双重染色。③一般从遗传角度上选择与抗原有较远的亲源关系的物种用于免疫接种。 回答了以上两个问题之后，齐老师这些又问出了四个常见问题，上海恒远钱经理都一一仔细回复。
1. 问：在我开始实验前可以测试来源于一些动物的免疫前血清或卵黄吗？
答：按照您的要求，在您开始您的实验前Agrisera会送你几个免疫前血清或卵黄样品。您可以选择具有背景信号的动物用于测试。
2. 问：在兔子中生产的抗体比那些在鸡中生产的更好吗？
答：生产抗体的过程是抗原，特异动物免疫反应和测试的结合。如哺乳动物的保守靶标蛋白，我们推荐使用在鸡中生产的抗体。因为他们在进化上亲缘关系更远，且他们的免疫系统与保守的哺乳动物蛋白反应更好，而这些保守哺乳动物蛋白可能不会被山羊或兔子的免疫系统识别。
3. 问：如果我的抗体在免疫定位试验中成功了，是否该抗体在免疫印迹和其它的试验中也能用呢？
答：再次强调，它取决于抗体识别蛋白质的哪一部分和在固定后或免疫印迹后蛋白的哪一部分暴露了。如果多克隆抗体是合成肽，它能识别抗原池，如果这类抗原固定后没有暴露，抗体将不会识别抗原。在某些情况下在缓冲液中加入6-8M尿素有助于蛋白质的暴露。
4. 问：如何储存抗体？
答：血清中的抗体，对于抗体这是一个非常稳定的存储形式。在-20℃或-70℃的血清通常可以保存多年。在一些特殊的情况下，anti-peptide抗体储存的时间更短。短时间可以储存在4℃。在某些情况下操作要更加小心，步在-20℃冷冻，之后放于-70℃冷冻的效果更好。
上海恒远给出的常规建议：
① 对于较大体积的亲和纯化抗体，滤灭的抗体样本和分成等份的液体避免多次冻融。
② 存储蛋白质的浓度在0.5-1mg/ml。
③ 检查蛋白质在不同储存条件下的稳定性，尤其是IgM。
钱经理为客户解说ELISA抗体的六大常见问题，齐老师对我司的售后服务赞不绝口。非常感谢吉林大学齐老师对我公司的大力支持！
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