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九月精彩,最新ELISA技术参数分析出

阅读次数:1210   发布时间:2014/9/3 8:59:13

     翻开前面的新闻动态,在本网站商铺建立至今共有248条信息,记录着相关上海恒远生物的点点滴滴。每当我司技术人员总结出相关elisa试剂盒及其他产品的新信息都会时间发布出来分享给大家,开学季已经到来,慢慢的有不少实验室在为本学期的ELISA实验而做准备,上海恒远也有新的资讯内容要分享给大家!下面一起来看看九月精彩:*新ELISA技术参数分析出。

    将样加入孔中并孵育,如果其中存在HEVIgM抗体,这些抗体就会与HEV的多肽抗原结合,并固定在上面,洗板除去其它非特异性抗体和样品中的其它成份。然后加入羊抗人IgM-HRP(辣根过氧化物酶)酶结合物,经第二次孵育后,酶结合物就会与次孵育结合上的HEVIgM抗体相结合,洗板除去未结合的酶结合物,加入TMB底物溶液,在第三次孵育时会发生酶-底物反应,只有那些含有HEVIgM抗体和酶结合物所形成的复合物的孔才会发生颜色变化,加入硫酸溶液终止酶和底物间的反应,并在波长:450nm处测量O.D.值,按照本HEVIgM抗体ELISA试剂盒的测试标准,O.D.值大于或等于Cut-Off值的样品被认为是初试阳性。
    tunnel试剂盒与ELISA试剂盒的区别:tunnel试剂盒即为脱氧核糖核苷酸末端转移酶介导的缺口末端标记法。
    原理:细胞凋亡中,染色体DNA双链断裂或单链断裂而产生大量的粘性3’末端,可在脱氧核糖核苷酸末端转移酶的作用下,将脱氧核糖核苷酸和荧光素、过氧化物酶、碱性磷酸酶或生物素形成的衍生物标记到DNA的3’末端,从而可进行凋亡细胞的检测。由于正常的或正在增殖的细胞几乎没有DNA的断裂,因而没有3’末端形成,很少能够被染色。TUNEL实际上是分子生物学与形态学相结合的研究方法,对完整的单个凋亡细胞核或凋亡小体进行原位染色,能准确地反应细胞凋亡典型的生物化学和形态特征,可用于石蜡包埋组织切片、冰冻组织切片、培养的细胞和从组织中分离的细胞的细胞形态测定,并可检测出极少量的凋亡细胞,因而在细胞凋亡的研究中被广泛采用。
    近二十几年来,免疫学分析方法发展突飞猛进,尤其是在使用标记了的抗原和抗体的分析技术以后,使原来许多经典的分析方法在敏感性和特异性方面都不能相比。继50年代的免疫荧光和60年代的放射免疫分析技术之后,在70年代初期又建立了用酶来标记抗原或抗体的分析技术。由于酶的高效生物催化作用,一个酶分子在数分钟内可以催化几十几百个底物分子发生反应,产生了放大作用,使得原来极其微乎其微的抗原或抗体在数分钟后就可被识别出来,这种技术被称为酶联免疫吸附试验法,本法自70年代初期由VAN WEEMEN、SCHUARS.ENGVALL及PERLMARN等相继分别报道后,现已引起广泛重视。
      
    ELISA试剂盒方法是免疫诊断中的一项新技术,现已成功地应用于多种病原微生物所引起的传染病、寄生虫病及非传染病等方面的免疫诊断。也已应用于大分子抗原和小分子抗原的定量测定,根据已经使用的结果,认为ELISA法具有灵敏、特异、简单、快速、稳定及易于自动化操作等特点。本法不仅可以用来测定抗体,而且也可用于测定体液中的循环抗原,所以也是一种早期诊断的良好方法。因此ELISA法在生物医学各领域的应用范围日益扩大,可概括四个方面:
1.免疫酶染色各种细胞内成份的定位。 
2.研究抗酶抗体的合成。 
3.显现微量的免疫沉淀反应。 
4.定量检测体液中抗原或抗体成份。 
    酶联免疫吸附试验法以其灵敏度高(可达ng甚至pg水平),特异性好等优点,在生命科学各领域得到广泛应用,它已迈出医药、临床领域,步入农业、渔业、畜牧业和食品加工业。
  
    ELISA试验是一种敏感性高,特异性强,重复性好的实验诊断方法。由于其试剂稳定、易保存,操作简便,结果判断较客观等因素,已广泛应用在免疫学检验的各领域中。ELISA检测试剂盒是用于体外定性检测人血清或血浆中的抗人类戊型肝炎病毒IgM抗体ELISA检测。ELISA试剂盒应用定性夹心免疫检测技术,用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板条,这些多肽是中国型HEV毒株核心氨基酸序列中抗原性很强的肽段,分别来自于该毒株的开放阅读框2和开放阅读框3。
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