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实验室里常见溶液配制

点击次数:889   发布时间:2020/6/30 13:31:44

    溶液是由一种或几种物质分散到另一种物质里,组成的均一、稳定的混合物,被分散的物质(溶质)以分子或更小的质点分散于另一物质(溶剂)中。物质在常温时有固体、液体和气体三种状态。因此溶液也有三种状态,大气本身就是一种气体溶液,固体溶液混合物常称固溶体,如合金。一般溶液只是专指液体溶液。液体溶液包括两种,即能够导电的电解质溶液和不能导电的非电解质溶液。所谓胶体溶液,更确切的说应称为溶胶。其中,溶质相当于分散质,溶剂相当于分散剂。在生活中常见的溶液有蔗糖溶液、碘酒、澄清石灰水、稀盐酸、盐水、空气等。

    今天给大家分享的是实验室里面常见溶液配制,有需要的伙伴可以收藏起来!

    一、PBS:
    取 PBS溶于1000ml的蒸馏水中,混匀,测pH值应在7.2-7.4之间,若偏离此范围,请用0.1N的HCL或NaOH调整。

    二、TBS:
    2.1 Tris缓冲液配方:(0.5 M pH7.6),Tris(三羟甲基氨基甲烷)60.57g,1N HCL 约420ml,双蒸水 加至1000ml。
    Tris缓冲液配制方法:
    先以少量双蒸水(300-500ml)溶解Tris,加入HCl后,用HCl(1N)或NaOH(1N)将pH调至7.6, *后双蒸水加至1000ml。此液为储备液,4℃冰箱中保存。
    2.2 TBS配方:
    Tris-HCI缓冲液(0.5M pH7.6) 100ml,NaCI 8.5-9g (0.15mol/L),双蒸水 加至1000ml
    TBS配制方法:
    先以少量双蒸水溶解NaCl,再加入Tris-HCl缓冲液,*后加双蒸水至1000ml,充分摇匀。

    三、枸橼酸盐缓冲液(Citrate buffer):
    3.1 储存液:
    A. 0.1M枸橼酸溶液:称取21.01g枸橼酸(C6H8O7·H20)溶于1000ml蒸馏水中。
    B. 0.1M枸橼酸钠溶液:称取29.41g枸橼酸钠(C6H5Na3O7·2H20)溶于1000ml蒸馏水中。

    3.2 工作液:
    取9ml A液和41ml B液加入450ml蒸馏水中,溶液pH值应为6.0±0.1

    四、胰酶(Trypsin):
    4.1 胰蛋白酶消化液:
    常用浓度为0.125%,即使用前将一滴试剂1胰酶溶液和三滴试剂2胰酶稀释液均匀混合(1:3稀释),则可直接滴加使用。胰酶的*终浓度可以根据使用者的要求进行调整,浓度范围可以从0.05%(1:10稀释)至0.25%(1:1稀释)。

    4.2 胰蛋白酶:
    取0.05g或0.1g胰蛋白酶加入到100ml 0.05%或0.1% pH7.8的无水氯化钙水溶液中,溶解即可。

    五、胃酶(Pepsin):
    4%胃蛋白酶,用0.1mol/L HCL配制。(我公司备有胃蛋白酶消化工作液,不需稀释直接滴加使用,欢迎选购)

    六、DAB:
    6.1 DAB Kit:
    使用前只需将试剂盒提供的A、B、C三种试剂各一滴加至1ml双蒸水中,即可获得1ml DAB工作液,简单易用。
    6.1 DAB:
    6mgDAB溶于10mlTBS(0.05M pH7.6),再加入0.1ml浓度为3%的H2O2,过滤掉沉淀物,即可。

    七、AEC:
    4mg AEC溶于1ml二甲基甲酰胺中,加入14ml浓度为0.1M的醋酸缓冲液(pH5.2),然后加入0.15ml 3%H2O2,过滤掉沉淀物。

    八、RIPA:
    1×PBS,1%NP 40,0.5 sodium deoxycholate,0.1% SDS(此液体可长期保存)。以下抑制剂以储存液方式保存,临用前加入RIPA中。
    8.1 10mg/ml PMSF异丙醇溶液(用量为10ml/ml)
    8.2 Aprotinin(Sigma产品,用量为30ml/ml)
    8.3 1000mM sodium orthovanadate冷冻液(用量为10ml/ml)

    九、Blotto A:
    常规使用1×PBS,5% milk,0.05% Tween 20。

    十、Blotto B:
    与Phosphotyrosine抗体共用,1×PBS,1% milk,0.05% Tween 20。部分实验中milk可完全去除,但可能引起背景增高。

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原创作者:上海恒远生物科技有限公司

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