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ELISA试剂盒方法之优势劣势

点击次数:105   发布时间:2018/8/16 10:21:34

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我们知道,elisa试剂盒可分为多种类型测定,是一种广泛应用在测定液体样本中的蛋白、抗体、或激素的免疫分析技术。 我公司技术部将各种ELISA试剂盒常用方法的优势劣势进行对比,结果如下:
一、直接法:将抗原直接固定在固相载体上,加入酶标记的一级抗体,即可测定抗原总量,此一级抗体的特异性非常重要。
优势:操作手续简短,因无须使用二抗可避免交互反应。
劣势:试验中的一抗都得用酶标记,但不是每种抗体都适合做标记,费用相对提高。
二、间接法:此测定方法与直接法类似,ELISA试剂盒差别在于一级抗体没有酶标记,改用酶标记的二级抗体去辨识一级抗体来测定抗原量。
优势:二抗可以加强信号,而且有多种选择能做不同的测定分析。不加酶标记的一级抗体则能保留它zui多的免疫反应性。
劣势:交互反应发生的机率较高。
三、双抗体夹心法:被检测的抗原包被在两个抗体之间,其中一个抗体将抗原固定于固相载体上,即捕捉抗体。另一个则是检测抗体,此抗体可用酶标记后直接测定抗原的量;或不标记,再透过酶标记的二级抗体来测定抗原的量。这两种抗体必须小心选取,才可避免交互反应或竞争相同的抗原结合部位。
优势:高灵敏、高专一性,抗原无须事先纯化。
劣势:抗原一定得拥有两个以上的抗体结合部位。
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