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最新ELISA试剂盒研发/生产要求公布

点击次数:6879   发布时间:2014/9/15 10:02:28

    试剂盒的优势主要体现在了超高的特异性、正确性、精确度等几个方面,质量及其优点与研发生产有着密切的关系,下面一起随上海恒远来看*新elisa试剂盒研发/生产要求公布。
    首先,我们先来为您对其特异性进行一个具体的讲解,其实特异性也就是指在PCR扩增过程中,专一性地扩增目的片断而非其他片断的机能。PCR实验的敏捷度与特异性是一对此长彼消的特性,这也决定我们实验体系调节实际就是找到适合实验的敏捷度与特异性的平衡点。
    模板、引物性 质及质量、反应前提的控制等均会影响PCR扩增的特异性。在PCR实验本身的敏捷度很高,且实验前提未充分优化的情况,通常会在目的片断泛起的同时伴随有其他的杂带,即发生非特异性扩增的现象。近年来的研究结果表明,缓冲液的品质对保证PCR的特异性扩 增起着不可忽视的作用。一般的缓冲液中调节氢键作用的盐只有KCl,而东盛HSTM TaqMix的缓冲体系通过反应优化剂以及KCl/(NH4)SO4盐离子体系的平衡调节,明显进步了PCR扩增的特异性,降低背景。因为PCR体系中的众多成分,使得组合较多,筛选工作繁杂。
    
    在优化免疫学反应前提后,建立了克百威间接竞争ELISA法和直接竞争ELISA法,检测限分别为0.005mg/L和0.01mg/L,检测线性范围分别为0.005~10mg/L和0.01~10mg/L,并在此基础上研制了两种用于检测水、泥土、蔬菜、中毒样品的酶联免疫试剂盒,其ELISA试剂盒的重现性好,批内批间及整体变异系数均低于8.0%,试剂盒检测的正确度高,除呕吐物样品外,其余样品的回收率均在89.62%以上。
    ELISA试剂盒研发以2,3-二氢-2,2-二甲基-7-苯并呋喃氯甲酸酯为基础合成了克百威的两种半抗原,6—[[(2,3-二氢-2,2-二甲基-7-苯并呋喃基氧)羰基]氨基]已酸(BFNH)和4—[[(2,3-二氢-2,2-二甲基-7-苯并呋喃基氧)羰基]氨基]丁酸(BFNB)。 用合成的克百威免疫原免疫兔子后获得高效价、高特异性的抗克百威多克隆抗血清,用间接ELISA测定效价为1:16000~1:128000,纯化抗体效价为1:500000~1:4000000。并选择由BFNB-BSA免疫兔子所得的一种纯化抗体与辣根过氧化物酶偶联制备成酶标抗体,同时了测定了酶标抗体的活性,效价为1:4000。所得克百威多抗血清与丁硫克百威的交叉反应率6.19%,与呋喃酚的交叉反应率为4.00%,与供试的其它5种氨基甲酸酯类农药的交叉反应率均小于0.44%,对于三种有机磷农药的交叉反应率均低于0.12%。 同时,根据抗体抗原的特异性结合反应的原理,进一步研究了抗克百威抗体对小鼠克百威中毒后的解毒作用,试验结果表明,抗体可以较好地缓解克百威对乙酰胆碱酯酶按捺作用的症状,使中毒小鼠逐渐恢复正常。同时将这两种半抗原与载体蛋白牛血清蛋白(BSA)和卵清蛋白(OVA)偶联合成克百威免疫原和包被抗原,并用紫外光谱法测定克百威与载体蛋白结合物结合比。
    
    试剂盒检测限为0.04μg/kg,样本添加回收率为69.4%~107.5%,批内变异系数为7.8%~14.6%,批间变异系数为10.9%~16.5%。分别利用戊二酸酐法和碳化二亚胺法合成半抗原和免疫抗原免疫动物,制备特异性强的单克隆抗体。与仪器分析技术比拟具有使用利便、高敏捷度等特点,可在硝基咪唑类药物的残留量检测中施展重要作用。本实用新型涉及一种硝基咪唑类药物残留量检测的酶联免疫ELISA试剂盒。该试剂盒组成包括:96孔酶标板、酶标二抗工作液、硝基咪唑类药物抗体工作液、硝基咪唑类药物7个浓度的尺度品溶液、底物显色液、终止液、浓缩洗涤液、浓缩复溶液。该方法的建立为硝基咪唑类药物残留的检测提供了便捷、正确的分析检测手段。在筛选硝基咪唑类单克隆抗体的基础上,建立ELISA检测方法,并研制出对鸡肉中硝基咪唑类药物残留检测试剂盒。采用间接竞争ELISA方法,在酶标板微孔条上预包被偶联抗原,样本中含有的硝基咪唑类药物将和微孔条上预包被的偶联抗原竞争抗硝基咪唑类药物抗体,加入酶标二抗后,用TMB底物显色,样本吸光度值与尺度曲线比较再乘以其对应的稀释倍数,即可得出样品中硝基咪唑类药物的残留量。
    以上就是ELISA试剂盒研发与生产的要求,上海恒远提供各种种属试剂盒,严把产品质量关,致力提供优质、价位合理的科研产品,全面提升科研试剂的质量,将有利于更好地保障科研结果。

原创作者:上海恒远生物科技有限公司

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