【操作程序】
1 样本采集、存放及运输
1.1 样本采集：
所用取样器材必须经高压或干热灭菌。
若样品为活禽，建议取咽喉拭子和泄殖腔拭子：取咽喉拭子时将拭子深入喉头口及上颚裂来回刮几次取咽喉分泌液，取泄殖腔拭子时将拭子深入泻殖腔转一圈沾取粪便。然后将拭子一起放入盛有2ml PBS（含抗菌素）的试管，充分洗涤拭子，然后在管壁挤干液体，转入无菌离心管中备用。
若样品为新鲜肌肉或脏器，取待检样品2g于已洗净、灭菌并烘干的研钵中充分研磨，加10ml PBS混匀，取上清转入无菌离心管中备用。为使样品的代表性更强，也可取50克肉样，加入50ml无菌的PBS液，用Bagmixer均质器处理后，取上清备用。
若样品为血清、血浆或冷冻组织渗出液，则直接取用。
1.2 存放：
分离后的样本在2℃—8℃条件下保存应不超过24hr； -70℃以下可长期保存，但应避免反复冻融（*多冻融3次）。
1.3 运输：
采用或泡沫箱加冰密封进行运输。
2 样本处理：
2.1  取n个1.5ml灭菌离心管（n = 样本数+ 1管阴性对照+ 1管阳性对照），作好标记。
2.2  首先加入600ul裂解液（裂解液即提取液，有很强的腐蚀性，切勿沾到皮肤或衣物，否则立即用大量清水冲洗并擦干），然后分别加入待测样本、阴性对照、阳性对照各200ul（一份样本换用一个吸头）；再加入200ul氯仿，混匀器上振荡混匀5sec（不宜过于强烈，以免产生乳化层，也可用手颠倒混匀）。
2.3 于12,000g离心15min（如有条件，于4℃进行离心）。
2.4  取与步骤2.1.1中相同数量的1.5ml灭菌离心管，加入400ul异丙醇（－20℃预冷），作好标记。吸取步骤2.1.3各管中的上清液相转移至相应的管中（上清液应至少吸取500ul，注意不要吸出中间层，该层富含DNA和蛋白质），颠倒混匀。
2.5  12,000g离心15min，（注意固定离心管方向，即将离心管开口朝离心机转轴方向放置）。轻轻倒去上清，倒置于吸水纸上，沾干液体（不同样品应在吸水纸不同地方沾干）；加入600ul 75%乙醇（－20℃预冷），颠倒洗涤。
2.6  12,000g离心10min，（注意固定离心管方向，即将离心管开口朝离心机转轴方向放置）。轻轻倒去上清，倒置于吸水纸上，尽量沾干液体（不同样品应在吸水纸不同地方沾干）。
2.7  4,000g离心10sec（注意固定离心管方向，即将离心管开口朝离心机转轴方向放置）将管壁上的残余液体甩到管底部，用微量加样器尽量将其吸干（一份样本换用一个吸头，注意吸头不要碰到有沉淀一面），室温干燥5-10min（不宜过于干燥，以免RNA不溶）。
2.8  加入11ul DEPC水，轻轻混匀，溶解管壁上的RNA，2,000g离心5sec，冰上保存备用（注意：此时的RNA*易受RNA酶降解，请在2小时内进行PCR扩增）。